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科研中的miRNA研究方法總結(jié)microRNA(miRNA)是一類(lèi)長(zhǎng)度在22nt左右的內(nèi)源非編碼小RNA，廣泛存在于動(dòng)物、植物、病毒等多種有機(jī)體中。1993年，Lee等人在秀麗新小桿線(xiàn)蟲(chóng)(C.elegans)中發(fā)現(xiàn)了控制著線(xiàn)蟲(chóng)時(shí)序性發(fā)育的lin-4。2000年，Reinhart等發(fā)現(xiàn)了另一個(gè)具有轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)功能的小分子RNA：let-7。隨后的幾年時(shí)間里，許多研究人員相繼發(fā)現(xiàn)了這類(lèi)RNA，并將這些具有時(shí)空表達(dá)特異性的非編碼小分子RNA命名為microRNA(miRNA)。從長(zhǎng)的...
近年來(lái)隨著生物技術(shù)的不斷發(fā)展，出現(xiàn)了許多克隆新基因的方法和手段，如圖譜克隆技術(shù)、轉(zhuǎn)座子標(biāo)簽技術(shù)、mRNA差異顯示技術(shù)二基因組減法技術(shù)以及cDNA文庫(kù)篩選技術(shù)等。但上述方法人多具有實(shí)驗(yàn)周期長(zhǎng)、技術(shù)步驟煩瑣且工作量大等特點(diǎn)。cDNA末端快速擴(kuò)增技術(shù)（rapidamplificationofcDNAends，RACE）是一種基于PCR從低豐度的轉(zhuǎn)錄本中快速擴(kuò)增cDNA的5'和3'末端的有效方法，以其簡(jiǎn)單、快速、廉價(jià)等優(yōu)勢(shì)而受到越來(lái)越多的重視.經(jīng)典的RACE技術(shù)是由Frohman等（...
每當(dāng)拿到一個(gè)質(zhì)粒圖譜，是不是一下就有點(diǎn)懵了？這些ori、RBS、tet是什么？這些箭頭代表什么，轉(zhuǎn)錄的方向嗎？不要著急，申知心生物把這些告訴你，也許會(huì)解決你的困惑。質(zhì)粒和載體傻傻分不清楚質(zhì)粒(Plasmid)是附加到細(xì)胞中的非細(xì)胞的染色體或核區(qū)DNA原有的能夠自主復(fù)制的較小的DNA分子(即細(xì)胞附殖粒、又胞附殖粒)。大部分的質(zhì)粒雖然都是環(huán)狀構(gòu)型。載體即要把一個(gè)有用的基因（目的基因——研究或應(yīng)用基因）通過(guò)基因工程手段送到生物細(xì)胞（受體細(xì)胞），需要運(yùn)載工具（交通工具）攜帶外源基因進(jìn)...
RTPrimer的佳選擇通常RTprimer可分為三類(lèi)：oligodT，隨機(jī)引物以及基因特異性引物。OligodT引物之所以應(yīng)用范圍更加廣泛，是因?yàn)榭捎纱双@得mRNA的全長(zhǎng)拷貝。然而如果mRNA長(zhǎng)度過(guò)長(zhǎng)4kb，或者沒(méi)有polyA尾（原核mRNA或rRNA），就需要考慮使用隨機(jī)引物進(jìn)行RNA的反轉(zhuǎn)錄。隨機(jī)引物雖能長(zhǎng)基因的5’末端的轉(zhuǎn)錄，但并不能獲得整個(gè)基因全長(zhǎng)的cDNAs，且對(duì)RNA樣品質(zhì)量要求比較高，此時(shí)可用6-8個(gè)核酸聚合體來(lái)提高cDNAs的合成量。而對(duì)于真核生物的qPCR...
對(duì)于Elisa試劑盒的使用，總有解不完的疑問(wèn)，比如說(shuō)加樣器不確；特別10ul以下的加樣器，對(duì)成果影響；保溫設(shè)備不良；洗刷用水不規(guī)范。如何解決這些疑問(wèn)呢：1、加樣不；沒(méi)有混勻。加樣時(shí)必定要細(xì)心。加樣后，再查看，以防漏加、錯(cuò)加。2、加樣后，重復(fù)抽吸3次混勻，防止血清集合孔底，致使非特異性吸附。洗刷洗刷不①每次灌水洗刷，應(yīng)停止30秒鐘；②選用吸水紙作為襯墊，每次洗刷后扣干孔內(nèi)水分；3、可選用塑料洗刷瓶。加酶反響漏加滴加后，細(xì)心查看各孔成果判別①包含陰性對(duì)照孔在內(nèi)，各孔顯色普遍偏深；...
臨淵羨魚(yú)階組里的前輩們看起來(lái)個(gè)個(gè)都是牛人，各有各的事業(yè)，可是喂~誰(shuí)來(lái)提挈小生則個(gè)！導(dǎo)師：“在咱們這個(gè)組的大框架下自己找個(gè)坑填上去~”——坑在哪？師姐：“問(wèn)我問(wèn)題之前不能先自己查一下嘛？你這個(gè)問(wèn)題明明有現(xiàn)成答案呀~”——上哪查師兄：“去去去，小孩子一邊看文獻(xiàn)去！”——看不懂~_看什么文獻(xiàn)，怎么看？專(zhuān)業(yè)術(shù)語(yǔ)不懂怎么辦？好吧，大不了啃字典，先把組里發(fā)過(guò)的文章都過(guò)一遍好了。終于有一天組會(huì)討論時(shí)，哇我居然聽(tīng)懂了躍躍欲試階已經(jīng)能相當(dāng)熟練地在知網(wǎng)、NCBI等數(shù)據(jù)庫(kù)上查到自己想要的信息了，儀...
雖然說(shuō)內(nèi)科和外科都是相親相愛(ài)的一家人，但是細(xì)數(shù)一下，兩者之間還是有一些有趣的差別，看看網(wǎng)友們是如何總結(jié)的。區(qū)別一：內(nèi)科大夫多話(huà)癆皇上：此番遼國(guó)起傾國(guó)之力，那蕭皇后親率三十萬(wàn)大軍南下，諸位愛(ài)卿如何是好？?jī)?nèi)科大臣:啟稟皇上，臣以為還當(dāng)細(xì)細(xì)打探方能定奪，不宜早下決定。究竟是蕭皇后親征，還是南院大王統(tǒng)帥？又或者是其他將領(lǐng)？這分型應(yīng)當(dāng)明確。三十萬(wàn)兵力應(yīng)當(dāng)有所鑒別，據(jù)臣所知遼國(guó)連續(xù)三年大旱，北方更有金人犯境，能聚三十萬(wàn)兵力實(shí)在存疑，打個(gè)問(wèn)號(hào)。遼國(guó)大軍南下，是分兵幾路？每路兵馬幾何？還需完...
一、WesternBlot實(shí)驗(yàn)為什么要用內(nèi)參?WesternBlot實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行內(nèi)參校正已成為一種慣例。目的蛋白表達(dá)量的相對(duì)多少，前提條件是等量的組織細(xì)胞蛋白上樣，才有比較的基礎(chǔ)，特別是表達(dá)量不高時(shí)，上樣量的的差別就很有可能影響結(jié)果的分析。因此，在WesternBlot試驗(yàn)中，進(jìn)行內(nèi)參的檢測(cè)，有以下兩點(diǎn)作用：1、校正蛋白質(zhì)定量、上樣過(guò)程中存在的誤差，實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性；2、使用內(nèi)參可以作為空白對(duì)照，檢測(cè)蛋白轉(zhuǎn)膜情況是否、整個(gè)WesternBlot顯色發(fā)光體系是否正常。二、你的內(nèi)...
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