技術(shù)文章
Technical articles除了一些安全性評價動物實驗外，我們這里提到的大多數(shù)動物實驗都是整體科學(xué)研究計劃的一個重要組成部分，動物實驗往往是為了證明或演繹某一科研假說而采取的手段。要進行動物實驗的設(shè)計，我們有對一般科學(xué)實驗的整體設(shè)計進行簡單的論述。廣義來講，科學(xué)研究選題是由社會發(fā)展和人們生活水平?jīng)Q定的(如癌癥和心血管疾病的發(fā)生就和人們所處生活環(huán)境有很大的關(guān)系)；狹義來講，科學(xué)研究的選題是由研究機構(gòu)目標和能力來決定，或由研究者興趣來決定。(一)科研假說的形成科研假說(hypothesis)是科研活動的靈魂...
一、WesternBlot實驗為什么要用內(nèi)參?WesternBlot實驗結(jié)果進行內(nèi)參校正已成為一種慣例。目的蛋白表達量的相對多少，前提條件是等量的組織細胞蛋白上樣，才有比較的基礎(chǔ)，特別是表達量不高時，上樣量的的差別就很有可能影響結(jié)果的分析。因此，在WesternBlot試驗中，進行內(nèi)參的檢測，有以下兩點作用：1、校正蛋白質(zhì)定量、上樣過程中存在的誤差，實驗結(jié)果的準確性；2、使用內(nèi)參可以作為空白對照，檢測蛋白轉(zhuǎn)膜情況是否、整個WesternBlot顯色發(fā)光體系是否正常。二、你的內(nèi)...
ELASA：用于檢測未知抗體的間接法1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃過夜。2.次日洗滌3次。3.加稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,后一遍用DDW洗滌。4.加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。5.終止反應(yīng)：于各...
一、服務(wù)介紹PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學(xué)上，主要用來檢測組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個碳上的羥基氧化成醛基，再用Schiff試劑和醛基反應(yīng)使呈現(xiàn)紫紅色。隨著醫(yī)學(xué)實驗技術(shù)的發(fā)展，糖原染色應(yīng)用的范圍更加廣泛，如用以證明與鑒別細胞內(nèi)空泡狀的性質(zhì)，心肌病變及其他心血管疾病的診斷，糖原累積病診斷和研究，糖尿病的診斷和研究，用于某些腫瘤的診斷等。二、實驗原理PAS染色又稱過碘酸雪夫染色，糖原染色。PAS染色一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì)。過...
MTT增殖曲線，基本上就是基礎(chǔ)的功能實驗了，養(yǎng)過細胞的你應(yīng)該都會做。但是，要怎么樣才能省時省力呢？你也知道，如果用MTT的話，加入10ul的MTT后要等四個小時，在活細胞的線粒體中形成甲囋，然后在把培養(yǎng)基吸掉，再加上DMSO溶解，進行檢測。這個方法是常用的MTT方法，但是會有三個問題，*個是有的甲囋不容易溶解。還有一個問題就是，由于要讓DMSO充分溶解甲囋，所以會要混勻，就會產(chǎn)生泡沫，影響酶標儀讀值：第三個問題，就是在吸去培養(yǎng)基的時候，容易把甲囋也吸走，導(dǎo)致終讀值不準。當(dāng)然也...
血清的保存應(yīng)該注意以下幾點：（1）生物學(xué)實驗中需要長期保存的血清儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%，因此，血清在凍入低溫冰箱前，預(yù)留體積空間，否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。（2）熱滅活是指56℃，30分鐘加熱已解凍的血清。生物學(xué)實驗中加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補體成分（complement）滅活。除非，一般不建議作此熱處理，因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多，而且還會影響血清的質(zhì)量。補體...
1.將水迷宮加入適當(dāng)?shù)乃?，水溫控制?5±1℃。2.實驗前把動物帶入實驗室中熟悉環(huán)境。3.設(shè)置軟件。4.一階段：（定位航行）將小鼠頭對著墻壁依次放入四個象限水迷宮進行實驗（所有小鼠需全部做完后換下一象限）。若動物在60s內(nèi)登上平臺區(qū)域，則錄像結(jié)束。若動物在60s內(nèi)未登上平臺區(qū)域，則用木棍指引大鼠游上平臺，并停留30s。每只小鼠每天訓(xùn)練4次，訓(xùn)練天數(shù)為4天。5.每只動物實驗結(jié)束后需用干毛巾擦拭，必要時需要使用電吹風(fēng)吹干。6.二階段（空間探索）：待一象限到第四象限全...
一、曠場實驗介紹曠場實驗是利用動物對新開闊環(huán)境的恐懼而主要在周邊區(qū)域活動，在區(qū)域活動較少，但動物的探究特性又促使其產(chǎn)生在區(qū)域活動的動機，也可觀察由此而產(chǎn)生的焦慮心理。藥物可以明顯增加自主的活動而減少探究行為，劑量的抗精神病藥物可以減少探究行為而不影響自主活動。二、曠場實驗原理該實驗（openfieldtest)又稱敞箱實驗，是評價實驗動物在新異環(huán)境中自主行為、探究行為與緊張度的一種方法。以實驗動物在新奇環(huán)境之中某些行為的發(fā)生頻率和持續(xù)時間等，反應(yīng)實驗動物在陌生環(huán)境中的自主行為...
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